高保真PCR
| 货号 | AO3503 |
| 规格 | 件 |
| 品名 | 高保真PCR |
| 库存 | 有货（999 件） |
AO3503 高保真PCR
开泰生物 | 高品质科研试剂
| 货号 | AO3503 |
| 品名 | 高保真PCR |
| 规格 | 1ml |
产品介绍
规 格： 1 mL 5 × 1 mL 产品概述 常见问题解答 产品说明书 参考文献 COA查询 产品概述 产品描述 是一种即用型高保真 PCR 预混液，含有 MegaPfu DNA polymerase、buffer、dNTPMixture 以及稳定剂等。使用时，只需在制品溶液中加入模板和引物便可进行 PCR 反应，大大简化了操作过程，降低了 PCR 操作过程中污染的风险。本产品中使用的 MegaPfu DNA Polymerase 具有 5'→3'方向的DNA 聚合酶活性和 3'→5'的 DNA 外切酶活性，能纠正 DNA 扩增过程中产生的碱基错配，是一款高保真PCR 快速反应酶。使用本品扩增得到的 PCR 产物为平末端，若做 TA 克隆需加 A 处理后再与 T 载体连接。本产品扩增产物可适用于 2 × Ezmax® Universal CloneMix ( #24305)。 产品组分 组分 AO3503-01（200 rxn） AO3503-02（200 rxn） AO3503-03（200 rxn） ○ mL 5 × 1 mL 15 × 1 mL 保存条件 -20℃储存，≤ 0℃运输。 产品优势 ✽ 高保真度： MegaPfu DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶，具有5'→3' DNA聚合酶活性和3'→5' 的核酸外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配，其保真度比普通Pfu提高了8-10倍。 ✽ 操作简便： 反应体系只需加入引物和模板即可进行PCR扩增，简化了实验操作步骤并减少了人为误差，提高了实验通量和结果的可重复性。 ✽ 稳定性好： 产品含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。 实验流程 详情见说明书 常见问题解答 Q1: 无产物或产物量少 A1: 1.1引物：优化引物设计。 1.2退火温度：设置退火温度梯度，找到合适的退火温度。 1.3引物浓度：适当提高引物浓度。 1.4延伸时间：适当增加延伸时间至10-15 sec/kb。 1.5循环数：增加循环数至36-40个循环。 1.6模板纯度：使用高纯度模板。 1.7模板使用量：使用量参照反应体系推荐量调整并适当增加。 Q2: 有杂带或弥散条带 A2: 2.1 引物：优化引物设计。 2.2退火温度：尝试提高退火温度并设置退火温度梯度。 2.3引物浓度：适当降低引物浓度。 2.4循环数：减少循环数至25-30个循环。 2.5反应程序：使用两步法或Touch down PCR程序。 2.6模板纯度：使用高纯度模板。 2.7模板使用量：使用量参照反应体系推荐量调整并适当减少。 Q3: 样本量少 A3: 3.1直接PCR：简化实验流程，减少动手操作的时间，同时可以避免纯化过程中DNA的损失。 3.2梯度PCR：找到最优退火温度。 Q4: 特异性扩增 A4: 4.1降落PCR：与温度梯度PCR相比，降落PCR更有优势，降落PCR只需一次就可以获得很好的扩增效果，避免了对每对引物进行最佳复性温度的优化和测定工作，并且降落PCR在很大程度上减弱了仪器性能对扩增效果的制约。 4.2巢式PCR:巢式PCR是一种变异的聚合酶链式反应
